Este lienzo es una alegoría con un repertorio de símbolos colmados de significados especiales para los frailes del Colegio. La iconografía resume las principales devociones franciscanas: san José y la Virgen de Guadalupe, patronos de la Nueva España, ella a su vez patrona del Colegio; san Francisco de Asís, fundador de la orden; la Santísima Trinidad que presenta la unidad divina del Padre, del Hijo y del Espíritu Santo; y san Miguel Arcángel, patrono también de este Colegio. La Virgen se ubica al centro y une la labor franciscana en la tierra con el cielo; está sostenida por san Francisco, que a su vez protege con su capa a los frailes llegados de España y a los fundadores del Colegio. La figura principal del cuadro es la Guadalupana, a la que Miguel Cabrera le tuvo especial devoción, ya que él fue quien estudió la tilma de Juan Diego en 1751 con el fin de confirmar el origen divino del lienzo.