El recorrido de la sala inicia con una introducción sobre el poblamiento del continente Americano y la dispersión por este vasto territorio de los nuevos habitantes.

Muestra los primeros grupos de cazadores recolectores que habitaron el actual territorio mexicano.  Durante este tiempo se desarrollaron técnicas lapidarias y se descubrió el ciclo reproductivo de algunas plantas y animales, esto permitió, en épocas posteriores, practicar la agricultura intensiva, base de las diversas culturas prehispánicas.

Se exhibe la etapa lítica, con una serie de objetos como muestra del desarrollo tecnológico de los primeros pobladores del actual territorio mexicano, dividida en tres secciones: Arqueolítico, Cenolítico (inferior y superior), y Protoneolítico.

La sala concluye con la muestra de las primeras aldeas semisedentarias.